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PCR产物测序是一种常用的测定PCR扩增产物序列的方法，它可以用来确定特定DNA或RNA片段的序列。以下是PCR产物测序的一般步骤：
1、准备PCR产物
进行PCR扩增，使用适当的引物扩增目标DNA或RNA片段。确保PCR反应充分进行，并获得足够数量的PCR产物。
2、净化PCR产物
使用净化试剂盒将PCR产物从反应体系中净化。这将去除引物、缓冲液和其他PCR反应组分。
3、序列反应
准备测序反应体系，包括PCR产物、引物（通常与扩增时使用的引物相同）、测序试剂和缓冲液。将PCR产物和引物混合，使其浓度适当，并根据测序方法的要求进行处理。
4、测序反应
使用自动测序仪或其他测序设备进行测序反应。这些设备通常基于几代或下一代测序技术。
5、数据分析
通过测序设备生成的原始数据文件（如FASTQ格式）进行数据处理和分析。利用生物信息学工具，比如序列比对软件，将测序读数与基因组或参考序列进行比对和匹配。对于长序列的测序，可能需要进行多个测序循环（cycles）来覆盖整个序列。
6、结果解读
根据测序数据和比对结果，确定PCR产物的序列。验证序列的准确性，并进行必要的质量控制。
具体的PCR产物测序步骤会因所用测序方法和仪器而有所差异。因此，在操作时，请参考所使用的测序试剂盒说明书，并按照其指引进行实验操作。此外，严格的实验室技术操作规范和质量控制是确保测序结果准确和可靠的关键。
pcr的三个步骤如下：
1.变性:双链DNA在高温条件下(90~95℃)变成两条单链,作为DNA复制的模板;
2.退火:单链DNA在较低温度 F(37?60°C) 与引物互补结合,形成杂交双链结构;
3.延伸:升温至70~75℃,结合模板上的引物在耐热DNA聚合酶的催化下按 5'→3' 方向延伸,合成模板DNA的互不链。
PCR的介绍：
聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。
由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年，PCR已发展到第三代技术。1976年，中国科学家钱嘉韵，发现了稳定的Taq DNA聚合酶，为PCR技术发展也做出了基础性贡献。
PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
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